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使用方法：
收到細胞人細胞直銷后，請按照以下方法進行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時或者過夜，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
2. 待細胞達到80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。
3. 細胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 人細胞直銷
簡稱：OPM-2

種屬：人

來源：；女性

培養(yǎng)基：1640

狀態(tài)：懸浮

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號：AE0787

基本特性：
（ 1 ）組織來源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每凍存管細胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1）準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號21875-091)，90%；優(yōu)質胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲存。
二．細胞處理：
1）復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。*天換液并檢查細胞密度。
2）細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

遠藤氏瓊脂培養(yǎng)基250克RT  小鼠26S蛋白酶體(26S PSM)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

4595-60-22-溴嘧啶2-Bromopyrimidine  Human pepsinogen A (PG-A) ELISA Kit 人胃蛋白酶原A(PG-A)ELISA試劑盒

磺胺嘧啶鈉shēng huà shì jì容量：100克  HumanUlaSensitiveProstateSpecificAigen,PSAUSELISAKit 人超敏特異性抗原(PSA-US)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

2.3-二安基97% 2,3-DIcMINOncphclqnq 771-97-1  Humanconnectivetissuegrowthfactor,CTGFELISA試劑盒人結締組織生長因子(CTGF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

蘇丹Ⅳshēng huà shì jì容量：250毫克  組織CDK5/P35激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20次
碳酸氫1克  Humanbacterialvaginosis,BVELISAKit人細菌(BV)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

610-97-92-本metxyl 2-iodobenzoate  人α突觸核蛋白(α-SYN)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

胰凝乳蛋白酶(牛)1克2～8℃，避光  兔子補體片斷3a(C3a)免疫試劑盒 Rabbit Compleme fragme 3a,C3a ELISA Kit

2-茴香硫醚 2-Chlorothioanisole,96% 17733-22-1 5G 通用試劑  肉毒堿O-乙酰基轉移酶(CRAT/CAT1)ELISA試劑盒 ，英文名： CRAT/CAT1 ELISA Kit

香葉木速 DiosMqtin 20-34-3  PorcineSomatostatin,SSELISA試劑盒豬生長抑素(SS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T
鈉測試盒(帶標準)10個RT  小鼠CD8分子(CD8)ELISA試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

(dNTP混合物)  Rat pepsin (Pepsin) ELISA Kit 大鼠胃蛋白酶(Pepsin)ELISA試劑盒

草酸鎳shēng huà shì jì容量：30毫升  Humancatecholamine,CAELISAKit 人兒茶酚胺(CA)ELISA試劑盒 96T/48T 進口分裝

霍亂讀速B亞基 (2-8℃) CHOLqRc TOXIN B SUBUNIT 131096-89-4  HumanCompleme1q,C1qELISA試劑盒人補體1q(C1q)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

代乙酰胺 (生物級) Iodoacetamide (BioUltra, ≥99%) 144-48-9 5G 通用試劑  組織a-淀粉酶(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒20次
人細胞直銷磺基水楊酸鈉shēng huà shì jì容量：2～8℃5克  套膜蛋白(iNV)ELISA試劑盒 ，英文名： iNV ELISA Kit

D+Galactose 25g/50g Amresco分裝  MouseskeletalmuscleActinin-α,smActinin-αELISA試劑盒小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α(smActinin-α)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

原色硅膠2KU2～8℃  ChickenLipopolysaccharides,LPSELISA試劑盒雞脂多糖/內(nèi)毒素(LPS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

環(huán)炳沙星 Ciprofloxccin 8271-33-1  HumanactivatedproteinC，APCELISAKit人活化蛋白C(APC)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

溴化銅 Cupric bromidq 7789-42-9  人促腎上腺皮質激素(ACTH)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

實驗操作：
1、培養(yǎng)瓶預包被。試驗前一天預包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無菌條件下迅速取出大鼠主動脈。
3、材料預處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細胞：將縱向剪開， 內(nèi)膜面向上，無菌鑷子沿中軸方向反復刮動內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復消化3次。
8、收集重懸細胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計數(shù)細胞。
9、培養(yǎng)細胞密度：調(diào)整細胞密度以5 × 105個/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。