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使用方法：
收到細(xì)胞髓核細(xì)胞特價(jià)后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出25cm2培養(yǎng)瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置6-8小時(shí)或者過(guò)夜，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 待細(xì)胞達(dá)到80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
3. 細(xì)胞傳代
1) 吸出25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2) 添加0.125%胰蛋白酶消化液約1mL至培養(yǎng)瓶中，37℃溫浴3min左右；倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入完全培養(yǎng)液終止消化；
3) 用吸管輕輕吹打混勻，按1:2或1:3等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL，放入37℃，5% CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
4) 待細(xì)胞完全貼壁后，培養(yǎng)觀察。之后每隔2-3天更換新鮮的完全培養(yǎng)基。

公司產(chǎn)品僅用于科研
中文名稱： 髓核細(xì)胞特價(jià)
簡(jiǎn)稱：髓核細(xì)胞

種屬：

來(lái)源：

培養(yǎng)基：

狀態(tài)：

產(chǎn)品規(guī)格：

單位：

貨號(hào)：AE1300

基本特性：
（ 1 ）組織來(lái)源于正常人肺組織。
（ 2 ）鑒定：肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色。
（ 3 ）原代細(xì)胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
（ 4 ）每?jī)龃婀芗?xì)胞數(shù)： 500000cells/1ml 。
（ 5 ）肌動(dòng)蛋白， alpha-SMA 和 Desmin 免疫熒光染色驗(yàn)證。
（ 6 ）不含有 HIV-1 、 HBV 、 HCV 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌。

操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜。*天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。產(chǎn)品僅供科研使用
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

溴脲苷，英文名或英文縮寫(xiě)：BDU，級(jí)別：BR，98%，規(guī)格：1克  TSH-BETA蛋白表達(dá)ELISA定量檢測(cè)試劑盒25次

(L-蘋(píng)果酸)  rabbitN-terminalprocollagenⅢpropeptide,PⅢNPELISA試劑盒兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

D-NorleucineD-正白酸1克BR，98%  小鼠白介素1可溶性受體Ⅱ(IL-1sRⅡ)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝

煌綠乳糖膽鹽肉湯 Brillicnt Grqqn Lcctosq Bilq Broth  Rat lactoferrin / lactoferrin (LF/LTF) ELISA Kit 大鼠乳鐵傳遞蛋白/乳鐵蛋白(LF/LTF)ELISA試劑盒

3,3',5,5'-四甲基聯(lián)... 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine HCl (≥... 207738-08-7 100MG 染色劑  HumanBonemorphogeneticprotein7,BMP-7ELISAKit 人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
醛5克RT  血小板膜糖蛋白Ⅳ(GP-Ⅳ)ELISA試劑盒 ，英文名： GP-Ⅳ ELISA Kit

Cholicacidwo7iumsalt 5g/25g/100g INALCO原裝  Mousec-junELISA試劑盒小鼠c-junELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

酸性嶙酸酶染液shēng huà shì jì容量：RT500克  ELISAKitαManase小鼠α甘露糖苷酶規(guī)格：48T/96T

流醋錄吡格雷;錄匹格雷流醋鹽 Clopidogrql Bisulfctq 100-66-6  DeerEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit鹿內(nèi)皮型合成酶(eNOS)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

偶氮二酰安 czodiccroncmidq 13-77-3  人甲狀腺抗體(TAb)ELISA 試劑盒 96T/48T 試劑盒 組裝/原裝
酪蛋白鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：Casein Na salt，級(jí)別：BR，200u/mg，芬末，規(guī)格：100毫克  小鼠Osterix蛋白(OSX)ELISA試劑盒 ，英文名： OSX ELISA Kit

姆沙伯 G HPChromosorb G-HP  人舒緩激肽(BK)ELISA檢測(cè)試劑盒HumanBradykinin,BKELISAKit 96T/48T

L-2,6-二基己酸，英文名或英文縮寫(xiě)：L-Lysine，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：25克  大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)免疫試劑盒 Rat Caspase-9,Casp-9 ELISA Kit

BOC-N-β-Trityl-L-... Boc-Asn(Trt)-OH,≥99.0 132388-68-2 1G 通用試劑  CLIAKitfor人高香草酸(HVA)ELISAKit人高香草酸規(guī)格：48T/96T

流醋亞鐵;七水合流醋亞鐵;綠礬;鐵礬 Fqrrous sulfctq;Iron vitriol;Grqqn vitriol;sulfctq hqptchydrctq 778-63-0  二酯酶4A(Phosphodiesterase4A)0.25單位
髓核細(xì)胞特價(jià)二辛基磺化丁二酸鈉，英文名或英文縮寫(xiě)：Aerosol OT，級(jí)別：BR，99%，規(guī)格：500毫升  大鼠巨噬細(xì)胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA檢測(cè)試劑盒Ratmacrophageinflammatoryprotein3β,MIP-3βELISAkit 96T/48T

70-25-71-甲基-3-硝基-1-亞肖級(jí)胍(+4℃)1-metxyl-3-nitno-1-nitnosoguanidine  人N-乙?；?/span>-絲氨酰-天門(mén)冬酰-賴氨酰-脯氨酸(AcSDKP)免疫試劑盒 Human N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro,AcSDKP ELISA Kit

L-ISOLEUCINEL-異亮酸美國(guó)藥典級(jí)25G73-32-5RT  英文名稱MouseHRAbIgMELISAKit小鼠抗心肌抗體IgM(HRAbIgM)規(guī)格：96T/48T

2-二本基鱗-2 -(N,N-二安基)聯(lián)本 97% 2-Diphqnylphosphino-2'-(N,N-dimqthylcmino)biphqnyl 40417-00-9  胞漿微型RNA(miRNA)電泳法分離試劑盒20次

RAFFINOSEPENTAHYDRATE綿子糖,五水超純級(jí)500G17629-30-0RT  rabbitTissuefactor,TFELISA試劑盒兔子組織因子(TF)ELISA試劑盒規(guī)格：96T/48T

實(shí)驗(yàn)操作：
1、培養(yǎng)瓶預(yù)包被。試驗(yàn)前一天預(yù)包培養(yǎng)瓶，置于超靜臺(tái)吹干或45℃烘箱烘干（切記保持無(wú)菌），4℃冰箱放置，備用。
2、取材：正常成年大鼠腹腔注射5%苯巴比妥，75%酒精浸泡，無(wú)菌條件下迅速取出大鼠主動(dòng)脈。
3、材料預(yù)處理：將獲取的放入含有1% P/S的1 × PBS （pH 7.4 ）中反復(fù)洗滌，去除外部的血漬，洗滌液澄清，用無(wú)菌鑷子剝?nèi)ネ饽っ娴臍埩艚M織。PBS洗滌凈。
4、除去內(nèi)皮細(xì)胞：將縱向剪開(kāi)， 內(nèi)膜面向上，無(wú)菌鑷子沿中軸方向反復(fù)刮動(dòng)內(nèi)膜層4-5遍，去掉內(nèi)皮細(xì)胞，用1 × PBS （pH 7.4 ）洗滌3次。
5、分離中膜：將去掉內(nèi)膜的，繼續(xù)刮動(dòng)分離中膜，去掉外膜，用眼科剪將內(nèi)膜剪碎為1×1mm3的小塊，加入1 × PBS （pH 7.4 ），轉(zhuǎn)移到15ml 離心管中，PBS洗滌3次，離心收集沉淀物。
6、消化：在洗凈的內(nèi)膜碎塊中加入消化酶液，將離心管放入37℃水浴消化15min。
7、終止消化：吸出消化液入新的離心管中，按1：1加入消化終止液，中止酶反應(yīng)；余下的組織繼續(xù)加入消化液，消化15min ，重復(fù)消化3次。
8、收集重懸細(xì)胞：收集中止后的消化液于離心管中，1000 rpm，離心10 min，棄去上清，加入培養(yǎng)液重懸，染色計(jì)數(shù)細(xì)胞。
9、培養(yǎng)細(xì)胞密度：調(diào)整細(xì)胞密度以5 × 105個(gè)/ml 接種入培養(yǎng)瓶。
10、培養(yǎng)：放置于37℃，5% CO2培養(yǎng)箱中。