|
| 產(chǎn)地 | 進口、國產(chǎn) |
| 品牌 | 帛科 |
| 貨號 | BKP4023 |
| 用途 | 公司產(chǎn)品僅用物科研 |
| 包裝規(guī)格 | 50次 |
| 純度 | % |
| CAS編號 | |
| 是否進口 | 是 |
PCR實驗方法步驟：
方法
1：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix （2mM）
4 μl 引物1（10pM）
2 μl 引物2（10pM）
2 μl Taq酶 （2U/μl）
1 μl DNA模板（50ng-1μg/μl）
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執(zhí)行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環(huán)擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環(huán)30-35次，在72℃ 保7min。
3：伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應，PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μ進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
牛分支桿菌卡介苗PCR檢測試劑盒供應 | Mycobacterium bovis BCGPCR | BKP4023 |
技術服務內容：
實驗步驟包括RNA提取、反轉錄、PCR和瓊脂糖凝膠電泳，以軟件分析電泳條帶的灰度值（IOD值），通過與內參基因的灰度值比較，判斷目的mRNA的相對表達量。
特點優(yōu)勢：
1. 特異性：牛分支桿菌卡介苗PCR檢測試劑盒供應使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學分析，經(jīng)過GenBank及自建龐大數(shù)據(jù)庫的比對，確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段，可實現(xiàn)對細菌種屬及血清型的特異檢測，特異性均達到100%。
2. 重現(xiàn)性：該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實驗菌株的驗證，重現(xiàn)性為100%。
3. 靈敏性：該系列產(chǎn)品可實現(xiàn)對檢測菌的高靈敏檢測，當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時，可實現(xiàn)對其的直接檢測，無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性：檢測范圍廣，涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種及腸道致病菌，可實現(xiàn)對臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測，整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優(yōu)勢1：序列資源豐富，除GenBank公布的序列外，公司還進行了大量菌株的序列破譯，從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。6. 優(yōu)勢2：該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實驗驗證，憑借公司擁有的豐富的菌種資源，每一種檢測試劑盒均經(jīng)過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證，確保在使用過程中不會出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報告結果。本產(chǎn)品只適用于科研，不能用于臨床診斷。
IFNA13 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNA13 / Ierferon alpha-13 蛋白 (Fc 標簽)Cholesterolesterase膽甾醇酯酶(豬胰)500克BR，800u/mg
J774A.1(小鼠單核巨噬細胞) 5×106cells/瓶×2 空腸彎曲桿菌亞麻酸 Methyl linolenate,≥99% 301-00-8 100MG 通用試劑
組織源性原代細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)/1ml4-羌基磺醋 HqPqS,1M SOLUTION 7362-42-9
EGFL7 Others Human 人 EGFL7 / VE-statin 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) TBSBUFFER,20XLIQUIDTBS緩沖液 20X 濃縮液超級4LRT
人低分化;GLC-82 [GLC82](a-環(huán)狀糊精)
EFNB2 Others Rat 大鼠 Ephrin-B2 / EFNB2 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸平陽霉素（標準品）Bleomycin A5 Hydrochloride 質量規(guī)格：HPLC含量測定
大鼠皮下脂肪細胞完全培養(yǎng)基 100mL琥乙紅霉素（標準品）Erythromycin ethylsuccinate質量規(guī)格：雜質檢查
FRhK-4恒河猴胚腎細胞 FRhK-4 Ganges RIver monkey embryo kidney cell DMEM培養(yǎng)基+10%FBS灰黃霉素（標準品）Griseofulvin質量規(guī)格：含量測定
IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標簽)Tivantinib(ARQ197)Tivantinib, ARQ 197質量規(guī)格：>98%，c-Met抑制劑
MCF 7B(人癌細胞) 5×106cells/瓶×2 BHK(幼倉鼠腎細胞)3-乙氧基－4－羥基苯（標準品）Ethyl vanillin質量規(guī)格：系統(tǒng)適應性
牛分支桿菌卡介苗PCR檢測試劑盒供應ENPEP Others Mouse 小鼠 ENPEP / Aminopeptidase A 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸苯達莫司?。藴势罚?/span>Bendamustine HCl質量規(guī)格：HPLC>98%,標準品
CL-0310VE(人內皮細胞)5×106cells/瓶×2澳洲茄邊堿（標準品）Solamargine質量規(guī)格：HPLC≥95%,標準品
RGC-5, 小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 人單核細胞型瘤，THP1細胞 GC-2spd(ts)(小鼠精母細胞)澳洲茄堿（標準品）Solasonine質量規(guī)格：HPLC≥94.50%,標準品
綠色熒光蛋白標記人細胞;MGC803-GFP安格洛苷 C（標準品）Angoroside C質量規(guī)格：>98%,標準品
EPCAM Others Human 人 EpCAM / OP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 托瑞米芬Toremifene 質量規(guī)格：>98%,BR
hMoCD14+-PB-c single donorpre-screened 外周血來源的人類CD14+單核細胞，單一來源，預選型 10 million 人結膜成纖維細胞HConF4'-庚基苯乙酮(>96.0%(GC))質量規(guī)格：>96.0%(GC)4'-Heptylacetophenone
人眼球脈絡膜成纖維細胞HOCF4'-正辛基苯乙酮(>95.0%(GC))質量規(guī)格：>95.0%(GC)4'-n-Octylacetophenone
SIRPG Others Cynomolgus 食蟹猴 SIRPG / SIRP gamma / CD172g 人細胞裂解液 (陽性對照) 4'-戊基苯乙酮(>95.0%(GC))質量規(guī)格：>95.0%(GC)4'-Pentylacetophenone
非洲綠猴腎細胞;CV-14-(反-4-丙基環(huán)己基)苯腈(>98.0%(GC))質量規(guī)格：>98.0%(GC)4-(trans-4-Propylcyclohexyl)benzonitrile
NCI-H1975細胞，人非小細胞 鼠肝星形細胞,HSC-T6細胞 CM-R047大鼠腸微細胞完全培養(yǎng)基100mL4-磺酰杯[4]芳烴水合物(>94.0%(T))質量規(guī)格：>94.0%(T)4-Sulfocalix[4]arene Hydrate
反應五要素：
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)*個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。
